酶联免疫吸附测定法（ELISA）是目前检测抗心磷脂抗体（IgM）最常用的方法之一，具有灵敏度高、特异性强、可定量等优点。其核心原理基于抗原-抗体特异性结合反应，通过酶促显色实现信号放大与结果判读。
技术原理
该试剂盒采用间接法ELISA设计。微孔板预先包被心磷脂抗原，当加入待测样本时，若其中含有抗心磷脂抗体IgM类，则会与固相抗原特异性结合。随后洗去未结合物质，加入酶标记的抗人IgM抗体作为二抗，与已结合的IgM形成“固相抗原-抗体-酶标二抗”复合物。再次洗涤后，加入显色底物（如TMB），酶催化底物发生颜色反应，颜色深浅与样本中抗体含量成正比。最后加入终止液停止反应，利用酶标仪在特定波长下读取吸光度值，通过标准曲线计算出样本浓度。
操作流程
试剂准备：将试剂恢复至室温，浓缩洗涤液稀释备用。
加样：设标准品孔和待测样本孔，每孔加入相应液体，轻混后封板，37℃孵育一定时间。
洗板：用洗涤液冲洗微孔数次，去除未结合成分，拍干。
加酶标二抗：每孔加入酶标工作液，封板后继续37℃孵育。
再次洗板：重复洗涤步骤，确保背景干净。
显色：加入显色剂，避光反应一定时间。
终止：加入终止液，溶液颜色由蓝变黄。
读数：使用酶标仪在450nm波长测定各孔吸光度，结合标准曲线得出结果。
整个过程约需2–3小时，操作简便，适合实验室常规开展。为保证数据准确，建议设置复孔、合理安排样本布局，并定期进行仪器校准与质控验证。该方法为相关疾病的辅助评估提供了稳定可靠的技术支持。
